lunes, 17 de octubre de 2011

NUMERO MAS PROBRABLE DE COLIFORMES TOTALES Y FECALES


PRACTICA DETERMINACION DE COLIFORMES TOTALES Y FECALES POR EL METODO DEL NUMERO MAS PROBABLE

Determinación de coliformes totales y fecales


Introducción: determinar coliformes totales y fecales de, muestras 
Tomadas de diferentes ubicaciones y tipos para así, saber que tan
Contaminadas se encontraban.



Objetivo: conocer el estado de contaminación del agua que
Consumimos o ya bien la que utilizamos para las necesidades básicas.




Conclusión: el agua utilizada para esta práctica dio resultados muy
Altos de coliformes pues no  usamos agua para beber.
Mi equipo utilizo agua de maneadero  de un charco y tuvo resultados   elevados. 






DETERMINACIO DE  COLIFORMES TOTALES Y FECALES  POR EL METODO DEL NUMERO MÁS PROBABLE
SERIE DE TRES TUBOS



1) disolver la cantidad en gramos de caldo lactosado (CL) en el volumen de agua destilada de acuerdo a las instrucciones del fabricante, si es necesario, calentar en parrilla eléctrica o agitador magnético.  

 2) llenar los tubos de ensaye conteniendo el tubo de fermentación invertido hasta un nivel ligeramente por encima del tubo de fermentación.

3) asegurarse que lo tubos de fermentación invertidos estén llenos en su totalidad del caldo, invirtiendo sucesivamente lo tubos de ensaye.

4) cerrar los tubos con un tapón de rosca, de forma que no quede muy apretado. Colocar lo tubos de ensaye en cristalizadores.

5) esterilizar lo tubos a 121 grados centígrados por 15 minutos a15 libras de presión. Enfriar y guardar en refrigeración hasta su uso.

6) a 3 tubos agregar 10 ml de muestra problema a otros 3 agregar 1 ml y a otros 3 agregar .1 ml con pipetas estériles.

7) incubar los tubos a 35 grados centígrados por 24  y 48 horas. Leer los tubos alas 24     y 48 horas. Anotar positivos de cada serie (aquellos tubos que presentan gas o aire dentro del tubo de fermentación se consideran positivos).

8) resembrar por medio de asada los tubos positivos en tubos de ensaye con tubos de fermentación conteniendo caldo EC(los tubos de caldo EC se preparan de manera similar a los de CL).

9) incubar los tubos sembrados de caldo EC a 44.5 grados centígrados por 24 horas. Contar los tubos positivos de cada serie (positivo= presencia de gas en el tubo de fermentación) y anotar los resultados.

10) por medio de la tabla de numero mas probable para series de 3 tubos, determinar el numero mas probable de coliformes fecales /100 ml de muestra problema.





  
Ejecución




Serie 3 tubos

Serie 1-  agregar 1.0 ml de muestra

Serie  2- agregar 1.0 ml de muestra

Serie 3-agregar 0.1 ml de muestra



Resultados  del equipo en la determinación de coliformes totales y fecales, de la muestra de agua de un charco en maneadero.

Disolución         sembrar en cl.    48 hrs tubos +    resembrar caldo         incubar x 24 hrs
10 ml                            3                          3                           3                                    3    

1ml                               3                          3                            3                                   3

0.1 ml                           3                          3                            3                                   3





Todos nuestros tubos dieron resultados positivos, al sembrarlos en CL , por lo que los re incubamos, en caldo lactosado y el resultante siguió siendo el mismo, al sacar cálculos fue:                                                             

COLIFORMES TOTALES: 2,400  

COLIFORMES FECALES: 4,800